Ультрабыстрый повторное окрашивание и обесцвечивание клеток образцы для диагностики опухоли

При лечении опухолей, микроокружение играет важную роль. Он часто содержит иммунные клетки, которые так изменили, что они стимулируют рост опухоли. В журнале «Прикладная химия», ученые внедрили метод, с помощью которого клетки из образцов опухолей и их окружение могут быстро (до 1 часа) будет циклически через окрашивание, обесцвечивание, а затем снова пачкали с флюоресцирующих антител-через приложение «черной дыры утоляет» (флуоресцентный зеленый) с помощью «клик-химии.»

Чтобы эффективно и точно бороться с опухолью, важно, чтобы конкретно охарактеризовать не только клетки опухоли, но и те в свою микросреду, в том числе опухоль-инфильтрирующие клетки иммунной системы. До сих пор, анализ этих динамических изменений с обычной биопсии и срезов ткани может занять несколько дней до недели, или не произойти вообще до начала лечения. Одним альтернативным методом является аспирационная биопсия, в которой всего лишь несколько тысяч клеток, взятых из разных участков опухоли и ее окрестности. Этот метод имеет несколько рисков и быстрее, потому что он не требует внедрения или срезания. Однако, для получения репрезентативной оценки иммунной популяции клеток в микроокружении опухоли, различные пятна должны быть проведены. Поскольку количество клеток настолько мал, это означает, что один и тот же образец должен быть повторно окрашенных, destained, и снова в пятнах. Однако, клетки слишком нежны для обычных, суровых обесцвечивающим, и процедуры займет слишком много времени.

Группой специалистов под руководством Джонатана Карлсон и Ralph Weissleder на общей больнице Массачусетс научно-исследовательского института и Гарвардской Медицинской школы (Бостон, Массачусетс, США) разработала сверхбыстрый, очень эффективный и нежный циклический метод многопараметрической белковых профилей отдельных клетках, который позволяет для многочисленных окрашиваний. Вместо разделения красителей или отбеливающих него флуоресценции пятна просто «выключили» с черным утоляет отверстие. Черная дыра антиоксидантов поглощать энергию флуоресценции красителя по всей видимой области спектра и преобразование его в тепло, как они получают достаточно в ближайшее время. Это выключает свечение красителя.

Метод выглядит так: через разъем, который содержит транс-cyclooctene группы, флуоресцентный краситель присоединяется к антителам, которые специфически узнают характерные молекулы маркер клеток. Если целевой маркер по заданному образцу, антитело связывается с ней и флуоресценции можно обнаружить. Затем добавил утоления, перевозивший группу тетразин-это. С помощью этой группы тетразины и транс-cyclooctene, утолитель может просто быть прикрепленной будучи «щелкнуло», как будто с щелчком (отсюда и термин клик-химии для Этот тип реакции). Таким образом утоляет сайт-конкретно и очень быстро и качественно приблизил к краске, тут же гася его флуоресценции. Скорость этого нажмите кнопку реакция замечательная, работает на порядки быстрее, чем ожидалось. Причиной этого может стать сильное взаимодействие красителя флуоресценции и утоления.

Следующий флюоресцирующих антител может быть нанесен сразу же после гашения флюоресценции. Исследователям удалось испачкать двенадцать различных молекул маркеров в пробе в течение одного часа. Это дает возможность быстро характеризовать иммунитет клеточных популяций в опухоли, чтобы выбрать наиболее подходящие процедуры.

сделать разницу: спонсорские возможности